動物核轉置體外胚生產技術
體細胞核轉置(somatic cell nuclear transfer:SCNT),又稱體細胞 複製,是遺傳學及發育生物學實驗中常使用體細胞和卵母細胞培育胚胎的技術手 段。體細胞核轉置技術,就是將一個具有全染色體(2N)供核細胞移入已除去核 的卵母細胞中,使後者不經過精子穿透等有性生殖過程,即以無性繁殖技術即可 被激活、分裂並發育成新個體,使得供核體細胞的基因得到完全複製。該技術提 取去核卵母細胞,並把供核體細胞核移入卵母細胞中。體細胞核轉置技術已被應 用於臨床治療及動物複製中。 本技術包含 (一) 供核細胞株建立:供核細胞株係指被複製個體進行採樣,以皮膚纖維母細 胞株最具便利性,建後續基因編程篩選所需。 (二) 供核細胞細胞週期調控技術:利用飢餓處理調控供核細胞至 G0期,以穩 定基因再程式化後重啟之表現,並提升複製胚發育能力。 (三) 核轉置顯微操作技術:透過顯微操作,完成包含卵母細胞去核、供核細胞 注入及電融合,產製核轉置胚。 (四) 核轉置胚激活技術:利用化學或是電激活處理方式,提供核轉置胚形成一 個類似受精後的激活狀態,進而持續分裂發育形成核轉置個體。 (五) 核轉置胚體外培養技術:核轉置胚需於體外環境培養發育至囊胚階段。