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- 期別
- 2015-48-3-196-203
- 作者
- 廖御靜、劉宇旃、陳怡秀、李佳馨、陳立人、楊鎮榮
- 關鍵字
- 豬誘導多能性幹細胞、綠色螢光蛋白質、自體分化、畸胎瘤、細胞移植
- 摘要
- 本研究目的為建立表現綠色螢光蛋白質之豬誘導多能性幹細胞(porcine induced pluripotent stem cell, piPS cell) 與探討細胞移植後之追蹤性。試驗係利用電穿孔法施以2 次直流電脈衝，將外源性綠色螢光蛋白質(green fluorescent protein, GFP) 報導基因轉染進畜試黑豬誘導多能性幹細胞，探討經轉染後之細胞的GFP 基因表現並檢視其多能性分化能力，以及其經活體移植後之表現。實驗結果顯示，piPS 細胞經轉染後可以持續且穩定表現綠色螢光；利用懸浮培養技術將細胞分化成類胚體與自體分化為三胚層後，綠色螢光仍可持續表現。此外，將表現綠色螢光之piPS 細胞移植於非肥胖糖尿病型重症聯合免疫缺陷型(nonobese diabetic/severe combined immunodeficiency, NOD-SCID) 小鼠，可誘發形成畸胎瘤(teratoma)，且移植部位之螢光表現可於移植後第30 天利用活體影像分析系統檢出；畸胎瘤體積於piPS 細胞移植後90 天內顯著增加，綠色螢光強度亦逐次明顯。因此，本研究所建立之表現綠色螢光的piPS細胞不論是細胞分化與細胞移植後，GFP 之表現持續且穩定，可做為細胞移植後之活體追蹤與即時監控之標的，有利於細胞移植治療研究。
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