卵母細胞取得方法與培養液成分對山羊胚體外發育之影響
- 期別
- 2018-51-2-148-156
- 作者
- 林信宏、黃政齊、康定傑、王得吉、郭廷雍、康獻仁、 劉世賢、劉炳燦、彭劭于、沈朋志
- 關鍵字
- 山羊、卵母細胞取得方法、培養液、成熟率、胚發育能力
- 摘要
- 本試驗之目的在探討兩種山羊卵母細胞回收方法對所取得卵丘卵母細胞複合體(cumulus-oocyte complexes,COCs) 品質之影響，以優化之山羊胚體外生產系統(in vitro production, IVP)。結果顯示，以手術刀片切割卵巢濾泡方式取得之COCs 品質為一與二級者之百分比顯著高於以注射針抽取者(55.7% vs.33.0%；P < 0.05)；進一步經體外成熟 (in vitro maturation, IVM) 培養後達成熟之百分比則均相近(78.3% vs. 77.7%)。此外，若將手術刀片切割卵巢濾泡方式取得之卵母細胞經體外成熟及體外受精(in vitro fertilization, IVF) 後，分別以合成輸卵管液(synthetic oviduct fluid, SOF) 或卵丘細胞共培養(co-culture) 方法進行體外培養(in vitro culture, IVC) 時，發現受精後之卵裂率(28.2%vs. 37.1%) 與囊胚發育率(4.3% vs. 0.0%) 於兩者間均為相近，但SOF 系統培養可突破山羊胚於體外培養時之阻滯期，而發育至囊胚階段。進一步評估於基礎成熟培養液中添加半胱胺(cysteamine) 和上皮細胞生長因子(epidermal growth factor, EGF)，對卵母細胞體外成熟及受精後發育之影響。結果顯示，成熟培養時，於基礎成熟培養液( 對照組)中同時添加cysteamine 與EGF，較僅添加EGF 組與對照組具有較高之囊胚率(36.1% vs. 15.7% vs. 10.0%；P < 0.05)。
綜合上述結果，在山羊胚之體外生產系統中，使用手術刀片切割法可回收較佳之COCs；於成熟培養液中同時添加cysteamine 與EGF，則有助於卵母細胞之成熟率及體外受精後之囊胚發育率。