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- 期別
- 2004-037-4-0301-0311
- 作者
- 蕭振文、蔡麗卿、陳裕信、曲?翔、楊鎮榮、李善男、陳立人:
- 關鍵字
- 牛胚、基因分析、發育、Oct-4。
- 摘要
- 本研究之主要目的，乃應用反轉錄-聚合?連鎖反應 (reverse tracription-polymerase chain reaction, RT-PCR) 分析以不同方式獲得的牛胚於不同發育階段Octamer-binding tracription factor 4 (Oct-4) 與β-actin mRNA之表現型式。同時，將此二種基因之PCR產物選殖並分析DNA序列，以確認Oct-4與 β-actin二種基因之正確性。分析之牛胚一是利用體外生產系統 (in vitro production, IVP) 與核轉置 (nucleus trafer, NT) 方法生產的2細胞期、4細胞期、8細胞期、桑椹期及囊胚期牛胚；二是田間牛胚非外科採集所取得之體內桑椹期及囊胚期牛胚，以套組萃取不同胚期牛胚之mRNA，進行RT-PCR獲得互補DNA (complementary DNA, cDNA)，再利用分析 Oct-4與 β-actin基因的引子對進行PCR。試驗結果顯示，利用 IVP與 NT所生產的2細胞期、4細胞期、8細胞期、桑椹期及囊胚期牛胚，以及採集自牛隻體內桑椹期及囊胚期的牛胚樣品，均有Oct-4與β-actin 之mRNA表現。而 Oct-4與 β-actin基因經過選殖與DNA序列分析後，進入 NCBI進行 DNA序列比對，結果 Oct-4基因與Bos taurus者完全相符。而做為對照的 β-actin基因亦正確表現，顯示在牛胚不同發育階段，不論是IVP、NT或體內胚，均可以見到此兩種基因的 mRNA表現。本研究結果可供開發檢測牛胚發育潛力之分子標記之用。
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